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生物安全柜性能的評(píng)價(jià)方法

發(fā)表時(shí)間:2020/12/7  |  點(diǎn)擊率:1651

1、柜體防泄漏性
柜體防泄漏測(cè)試有兩種方法,即壓力衰減法和肥皂泡法。壓力衰減法測(cè)試:將安全柜的前窗和排風(fēng)口封閉,柜體內(nèi)加壓到500Pa,保持30min后,測(cè)試柜內(nèi)氣壓,防泄漏性能良好的安全柜內(nèi)壓力應(yīng)不低于450Pa。肥電泡法測(cè)試:將安全柜的前窗和排風(fēng)口封閉,沿安全柜壓力通風(fēng)系統(tǒng)的所有焊縫、套接處和封口處的外表面噴或涂刷肥皂溶液,同時(shí)柜內(nèi)加壓到500Pa,觀察是否有氣泡產(chǎn)生。如果發(fā)生大的泄露,可通過(guò)輕微的氣流感覺(jué)和聲音發(fā)現(xiàn)。壓力衰減法使用壓力計(jì)或壓力傳感器系統(tǒng)測(cè)試,可以定量檢測(cè)柜體的密封性,是測(cè)試柜體防泄漏準(zhǔn)確、要求高的一種測(cè)試方法。肥皂泡法測(cè)試效果不如壓力衰減法準(zhǔn)確可靠。
2、高效過(guò)濾器完整性
高效過(guò)濾器主要起到過(guò)濾細(xì)菌、氣溶膠和灰塵顆粒的作用,凈化吹入安全柜工作區(qū)和排放出的氣體。高效過(guò)濾器的完整性是安全柜檢測(cè)的重要指標(biāo)。高效過(guò)濾器的檢測(cè)需要?dú)馊苣z發(fā)生器和光度計(jì)兩個(gè)設(shè)備。氣溶膠發(fā)生器用以產(chǎn)生氣溶膠顆粒,光度計(jì)用以測(cè)試高效過(guò)濾器的過(guò)濾效率。
(1)可掃描檢測(cè)的過(guò)濾器。運(yùn)行安全柜,去掉過(guò)濾器的散流裝置和保護(hù)蓋,安放氣溶膠發(fā)生器,將氣溶膠(其光散射強(qiáng)度至少應(yīng)等于10ug/L DOP產(chǎn)生的光散射強(qiáng)度)導(dǎo)入安全柜,產(chǎn)生均勻分布的高效過(guò)濾器上游氣流。光度計(jì)探頭在過(guò)濾器下游距過(guò)濾器表面不超過(guò)25mm,以小于50mm/s的掃描速率移動(dòng),使探頭掃測(cè)過(guò)濾器的整個(gè)下游側(cè)和每個(gè)組合過(guò)濾片的邊緣,掃測(cè)路線應(yīng)略微重疊。圍繞整個(gè)過(guò)濾器外圍,沿組合過(guò)濾片和框架的連接處以及圍繞過(guò)濾器和其它部件之間的密封處仔細(xì)掃測(cè)。所有檢測(cè)點(diǎn)的漏過(guò)率不超過(guò)0.01%。
(2)不可掃描檢測(cè)的過(guò)濾器。對(duì)于經(jīng)管道排氣的安全柜,在下游氣流的管道上鉆一個(gè)直徑大約10mm的孔,將帶有硬管光度計(jì)探針插入孔中進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)點(diǎn)的漏過(guò)率不大于0.005%。
3、噪聲
打開(kāi)安全柜的風(fēng)機(jī)和照明燈,使用聲級(jí)計(jì)測(cè)量安全柜前面中心水平向外30mm、工作臺(tái)面上方380mm處噪聲;關(guān)閉風(fēng)機(jī)和照明燈,測(cè)量相同位置背景噪聲。安全柜的噪聲不超過(guò)67dB。
4、照度
在安全柜工作臺(tái)面上,沿臺(tái)面兩內(nèi)側(cè)壁中心連線設(shè)置照度測(cè)量點(diǎn),測(cè)量點(diǎn)之間的距離不超300mm,與側(cè)壁小距離為150mm;關(guān)掉安全柜的燈,使用照度計(jì)從一側(cè)起依次在測(cè)量點(diǎn)測(cè)量背景照度,平均背景照度應(yīng)在(110±50)lx;打開(kāi)安全柜的燈,啟動(dòng)風(fēng)機(jī),依次在測(cè)量點(diǎn)測(cè)量照度。安全柜平均照度不應(yīng)小于650lx,每個(gè)照度實(shí)測(cè)值不小于430lx。
5、振動(dòng)
將振動(dòng)儀的傳感元件固定在工作臺(tái)面的幾何中心,測(cè)量安全柜正常工作時(shí)的總振動(dòng)振幅。關(guān)閉安全柜的風(fēng)機(jī)(室外風(fēng)機(jī)工作),測(cè)定背景振動(dòng)振幅。安全柜在頻率10Hz~10kHz的凈振動(dòng)振幅(總振動(dòng)振幅減背景振動(dòng)振幅)不超過(guò)5um。
6、人員、產(chǎn)品與交叉污染保護(hù)
人員保護(hù)有2種檢測(cè)方法:微生物法和碘化鉀法。微生物法需制備枯草芽孢、桿菌芽孢,測(cè)試后要經(jīng)過(guò)細(xì)菌培養(yǎng),操作復(fù)雜,用時(shí)較長(zhǎng),不便于外出開(kāi)展檢測(cè)。碘化鉀法是定義在EN 12469:2000上的,測(cè)試方法與微生物法相同,用碘化鉀代替了細(xì)菌,可當(dāng)場(chǎng)驗(yàn)證安全柜污染控制性能,操作性強(qiáng),用時(shí)較短。
(1)微生物法
將盛有5*108~8*108個(gè)/mL的芽孢懸浮液的噴霧器放在安全柜內(nèi),噴霧器噴嘴的軸線在工作臺(tái)面上方360mm處,噴嘴前端位于前窗操作口內(nèi)100mm處,噴霧方向平行于臺(tái)面且正對(duì)操作口;噴霧器的圓筒固定在臺(tái)面上的中心,一端貼住工作區(qū)的后壁,另一端從操作口伸出安全柜至少150mm,圓筒的軸線高于臺(tái)面70mm;6個(gè)撞擊采樣器呈左右對(duì)稱放置在柜前,6個(gè)采樣口正對(duì)安全柜;1個(gè)陽(yáng)性對(duì)照瓊脂培養(yǎng)皿放在圓簡(jiǎn)下;2個(gè)狹縫采樣器的采樣口平面與臺(tái)面平行,采樣口的垂直軸線在安全柜前方150mm處,各距內(nèi)側(cè)壁200mm;啟動(dòng)噴霧器,運(yùn)行5min。測(cè)試持續(xù)30min。在無(wú)菌的條件下,用濾膜濾取所有撞擊采樣器的采樣液體,將濾膜置于培養(yǎng)基上;有濾膜的培養(yǎng)基、對(duì)照培養(yǎng)皿和狹縫采樣器的培養(yǎng)皿在37℃下培養(yǎng),培養(yǎng)到24~28h時(shí)檢查計(jì)數(shù),如果呈陰性,繼續(xù)培養(yǎng)至總培養(yǎng)時(shí)間達(dá)44~48h時(shí)檢查計(jì)數(shù)。Ⅱ級(jí)生物安全柜用枯草芽孢、桿菌芽孢進(jìn)行實(shí)驗(yàn),從全部撞擊采樣器收集的芽孢菌菌落數(shù)應(yīng)不超過(guò)10cfu/次,狹縫采樣器的培養(yǎng)皿收集的芽孢菌菌落數(shù)應(yīng)不超過(guò)5cfu/次,對(duì)照皿應(yīng)呈陽(yáng)性(>300cfu)
(2)碘化鉀法
將氣霧發(fā)生器放置在安全柜的工作臺(tái)面上,使氣霧發(fā)生器圓盤(pán)的中心位于儀器模擬臂的中心上,圓盤(pán)的邊緣到安全柜平面開(kāi)口的距商是110mm,圈盤(pán)與安全柜開(kāi)口上邊緣平行。氣霧發(fā)生器產(chǎn)生霧狀的碘化鉀微小液滴,安全柜外模擬臂上的4個(gè)空氣采樣器采集從安全柜內(nèi)逃逸出的碘化鉀微粒。采樣結(jié)束后,取出采樣器內(nèi)的過(guò)濾薄膜,將薄膜放到PdC12溶液中顯色,計(jì)數(shù)薄膜上灰棕色的小圓點(diǎn)。Ⅱ級(jí)生物安全柜用碘化鉀法測(cè)試,保護(hù)因子應(yīng)不小于1*105,即每個(gè)薄膜上灰棕色的小圓點(diǎn)數(shù)都應(yīng)小于62個(gè)。重復(fù)實(shí)驗(yàn)5次,每次均應(yīng)符合要求。
在產(chǎn)品保護(hù)中,在安全柜的工作臺(tái)面上排滿敞開(kāi)的瓊脂培養(yǎng)皿;圓筒固定在臺(tái)面上的中心區(qū),一端貼住工作區(qū)的后壁,另一端從前窗操作口伸出安全柜至少150mm,.圓筒的軸線高于臺(tái)面70mm;盛有5*106~8*106個(gè)/mL的芽孢懸浮液的噴霧器放在柜外,噴霧器噴射軸在安全柜中心并與操作口上沿平齊,噴霧器的噴嘴前端位于操作口外100mm,噴霧方向平行于臺(tái)面,正對(duì)操作口;一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照瓊脂培養(yǎng)皿放在圓筒下;啟動(dòng)噴霧器,運(yùn)行5min。噴霧器關(guān)閉5min后蓋上瓊脂培養(yǎng)皿的蓋子;將培養(yǎng)皿在37℃下培養(yǎng),培養(yǎng)到24~28h時(shí)檢查計(jì)數(shù),如果呈陰性,繼續(xù)培養(yǎng)至總培養(yǎng)時(shí)間達(dá)44~48h時(shí)檢查計(jì)數(shù)。Ⅱ級(jí)生物安全柜用枯草芽孢、桿菌芽孢進(jìn)行實(shí)驗(yàn),菌落數(shù)應(yīng)不超過(guò)5cfu/次,對(duì)照皿應(yīng)呈陽(yáng)性。
對(duì)于交叉污染保護(hù),將盛有5*104~8*104個(gè)/mL的芽孢懸浮液的噴霧器置于安全柜內(nèi),緊靠左側(cè)內(nèi)壁的中心,噴霧器噴射軸線在工作臺(tái)面上30~76mm處,噴射方向平行于臺(tái)面,正對(duì)對(duì)面的側(cè)壁;兩排對(duì)照培養(yǎng)皿位于噴嘴下方,距噴霧器所在側(cè)壁360mm處放一排培養(yǎng)皿,距噴霧器所在側(cè)壁360mm外放一排培養(yǎng)皿;啟動(dòng)噴霧器,運(yùn)行5min。 15min后蓋上培養(yǎng)皿,在37℃下培養(yǎng)。將噴霧器放于靠右側(cè)內(nèi)壁中央重復(fù)測(cè)量。培養(yǎng)基培養(yǎng)到24~28h時(shí)檢查計(jì)數(shù),如果呈陰性,維續(xù)培養(yǎng)至總培養(yǎng)時(shí)間達(dá)44~48h時(shí)檢查計(jì)數(shù)。Ⅱ級(jí)生物安全柜用枯草芽孢、桿菌芽孢進(jìn)行實(shí)驗(yàn),菌落數(shù)應(yīng)不超過(guò)2cfu/次。
7、下降氣流流速
Ⅱ級(jí)安全柜下降氣流流速應(yīng)為0.25~0.5m/s。下降氣流流速應(yīng)在標(biāo)稱值士0.015m/s。均勻下降氣流的安全柜,各測(cè)量點(diǎn)實(shí)測(cè)值與平均流速相差均應(yīng)不起過(guò)±20%或±0.08m/s。非均勻下降氣流的安全柜各區(qū)域?qū)崪y(cè)的下降氣流流速應(yīng)為其區(qū)域下降氣流標(biāo)稱值±0.015m/s,各測(cè)量點(diǎn)實(shí)測(cè)值與其區(qū)域平均流速相差均應(yīng)不超過(guò)±20%或±0.08m/s。
(1)均勻下降氣流的安全柜
在工作區(qū)上方高于前窗操作口上沿100mm的水平面上,用風(fēng)速儀多點(diǎn)測(cè)量穿過(guò)該平面的下降氣流流速。測(cè)量區(qū)域邊界與安全柜的內(nèi)壁及前窗操作口的距離為150mm;測(cè)量點(diǎn)少應(yīng)有3排,每排少應(yīng)有7個(gè)測(cè)量點(diǎn),測(cè)量點(diǎn)等距分布,形成的正方形柵格不大于150mm*150mm。
(2)非均勻下降氣流的安全柜
在工作區(qū)上方高于前窗操作口上沿100mm的水平面上,用風(fēng)速儀多點(diǎn)(測(cè)量點(diǎn)間距不大于100mm)測(cè)量穿過(guò)該平面各區(qū)域的下降氣流流速。

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